Bufor rozwijający do Zymogramu [10X]

Zymografia jest techniką elektroforetyczną, opartą na SDS-PAGE, która obejmuje składnik enzymu skopolimeryzowany z żelem poliakrymalidowym. Próbki są przygotowywane w odpowiednim buforze do próbek Zymogramu bez konieczności jego ogrzania. Ma to na celu ochronę struktury i aktywności enzymu. Po elektroforezie należy usunąć SDS poprzez płukanie żelu w buforze renaturującym (Zymogram Renature Buffer), który zawiera niejonowany detergent. Następnie żele są równoważone w buforze rozwijającym (Zymogram Developing Buffer), który zawiera dwuwartościowy kation metalu potrzebny do aktywacji enzymu. Zymogram jest następnie barwiony (powszechnie czernią amidową lub Coomassie Brilliant Blue), uwidaczniając obszary trawienia w postaci czystych prążków na ciemnym tle, gdzie substrat został zdegradowany przez enzym. 

• Bufor do próbek Zymogramu [2X]: 62,5 mM Tris, 4% SDS, 25% glicerol, 0,01% błękit bromofenolowy o pH 6,8.
• Bufor renaturujący do Zymogramu [10X]: 25% Triton® X-100.
• Bufor rozwijający [10X]: 0,5 M Tris, 2 M NaCl, 50 mM CaCl₂, 0,2% Brij® 35 o pH 7 ,5.

0,5 M Tris-HCl, 2 M NaCl, 50 mM CaCl_2, 0,2% Brij®-35 o pH 7,5.